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本生闡述:Elisa試劑盒的溫育如何進行?
Elisa試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異,良好的儀器和正確的操作是ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。國內醫學檢驗一般均用板式點。
Elisa試劑盒的操作步驟:
方法一:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:小鼠ELISA試劑盒反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或較淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。
18、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。
方法二:用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。
其中還有一個步驟特別需要注意那就是洗滌:
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。
注:以上僅供參考,本產品僅供科研使用,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
ELISA試劑盒 天津本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。
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